Estamos sufriendo una verdadera epidemia de tuberculosis en Argentina

Precisión diagnóstica del nuevo y bioseguro ensayo molecular Orange G3 TBC en comparación con GeneXpert para el diagnóstico de tuberculosis en entornos con recursos limitados – Diagnostic accuracy of the novel and biosafe molecular assay Orange G3 TBC compared to GeneXpert for tuberculosis diagnosis in resource-limited settings – Juan Carlos Garberi , Gabriel Estryk, Richard Chiara, Patricia Callisperis, Patricia Loza, Luis Scigliano, Sandra Andrea Casevecchie, Juan Ezequiel Garberi, Edgar Villarte, Mike Acevedo, Mónica Castro, Guadalupe Calvo Quiroz, Alex Huarachi, Leydi Martinez, Lucia Langer, Luis Prieto-Valiente, Mitchell Liester, Carlos Franco-Paredes and Pierre Kory – DOI: 10.1177/20499361251386681 – https://journals.sagepub.com/doi/10.1177/20499361251386681

Por Juan Garberi

Estamos sufriendo una verdadera epidemia de tuberculosis como se muestra en la Fig. 1 Mapa tuberculosis en Argentina – Mapa Mortalidad por Tuberculosis – Reflexiones sobre la situación sanitaria que se oculta

Se muere una persona cada 8 hs en la Argentina 2025 de tuberculosis

Para que tengamos una enfermedad tiene que haber la intercepción de tres conjuntos. Hay tres conjuntos que tienen que aparecer, confluir, la intercepción de esos tres conjuntos serían la presencia del bacilo o del bicho, un mal ambiente, un ambiente que sea por ejemplo vivir en la calle o trabajar doce horas seguidas como lo que pasa en las fábricas textiles, o vivir con miedo, como nos inculcan permanentemente a través de los medios masivos de comunicación, el miedo es la mejor forma de generar dominación.

Cuando ocurre ese ambiente malo, el bicho malo, y nuestro cuerpo se desestabiliza, este equilibrio armónico y dinámico que es la vida misma, se desestabiliza por varias razones, después podemos comentar un poco lo que sería la enfermedad, ahí es donde el microbio aparece en nuestro cuerpo y viene a tomar nuestra tierra. El bicho toma la tierra nuestra y ahí se manifiesta la enfermedad. La tuberculosis no corresponde a una clase social, la tuberculosis corresponde a la intersección de estos tres conjuntos.

En una etapa en donde las clases menos pudientes no tenían una alimentación adecuada, entonces se había definido a la tuberculosis como la enfermedad de la pobreza y se comenzó a hablar en la decada del 60 siglo 20 que la tuberculosis había bajado en los estándares de contagio y como que estaba controlada. y ahora con todo lo que estamos viviendo, esencialmente el tema de la alimentación para mi es clave en todo esto y la falta de higiene, la falta a veces de no tener un lugar adecuado para dormir, y muchos otros factores han activado la enfermedad.

Mapa Mortalidad por Tuberculosis

Fig. 1 Incidencia TBC Argentina. Ministerio de Salud, Boletin 8 Lepra y Tuberculosis 2025

No podemos olvidar que vivimos en un país donde hay mas de 2 millones de niños en estado total de desnutrición y esto es una vergüenza porque supuestamente nuestro país podría producir alimentos para 300 millones de habitantes. Además hay grandes sectores de nuestro país que están ingiriendo agua contaminada, ya sea por contaminación ambiental con los agrotóxicos, por contaminación con arsénico, contaminación con los derivados de las mineras.

No pueden olvidarse que hace 5 o 6 años atrás la Barrick Gold tiró 3 millones y medio de litros de cianuro de sodio contaminando gran parte del norte de nuestro país, o sea hay una cuestión integral que genera que nuestro sistema inmunológico se disocie, se desarme y para poder estar sanos, ¿qué es la enfermedad? Teníamos que entrar a entender qué es una enfermedad, la enfermedad simplemente no la debemos tomar como algo malo, simplemente la deberíamos tomar como un aviso en nuestro cuerpo que estamos haciendo algo malo, cuando aparece una enfermedad es porque estamos haciendo algo malo.

Hay una gran tendencia, porque esto conviene obviamente a las transnacionales farmacéuticas, de tapar los síntomas, si comenzamos con un poquito de fiebre, en vez de investigar, ¿y por qué tengo la fiebre? Nos dicen toma esto para bajarte la fiebre, toma esto otro para bajarte la fiebre, toma el antibiótico que si a veces hay que tomarlo, te recetan como si nada directamente el paracetamol, que es hepatotóxico, sin analizar las consecuencias.

Exactamente, entonces nos tapan los síntomas, la fiebre es una respuesta de nuestro cuerpo, primero nos dice mira acá está pasando algo, yo reacciono de esta manera y reacciono de esta manera así que fíjate, bajate la fiebre, obviamente si la fiebre supera los 40 grados o los 39 y pico de grados hay que bajarla porque nos va a agarrar una convulsión, pero si no lo que tendríamos que hacer es darnos un baño, no tapar el síntoma y descansar, nuestro cuerpo se repara solo, es maravilloso, la naturaleza es maravillosa, somos emergentes de la naturaleza, si no entendemos esto es difícil que podamos tratarnos. Hay una cosa que que se llaman los biomarcadores y que lo he aprendido hace ya mucho tiempo, mi abuelo me lo enseñó pero después lo hemos conversado muchísimo con Andrés Carrasco, que Andrés Carrasco denunció el envenenamiento masivo con el glifosato que se hizo en nuestra población para vender la soja transgénica, supuestamente para tener dinero, pero de que sirve el dinero y luego nos morimos por la contaminación.

Si observamos los biomarcadores que son los bichitos de luz, las mariposas, las abejas, las ranas, los colibríes, esos se llaman biomarcadores, si ustedes van a un lugar, los pececitos pequeños van a un lugar y ven los biomarcadores, ese lugar está bueno para la vida porque nosotros somos naturaleza, no somos otra cosa. Si no hay ese lugar no es bueno para la vida, vayan a un campo de soja fumigado y van a ver si encuentran, hay un silencio absoluto, no escuchan nada.

Volviendo a la tuberculosis para tratarla primero hay que diagnóticarla. el primer paso es el diagnóstico.

El grafico 1, que adjunto, fue obtenido de la presentación del Ministerio de Salud de la Nación Argentina, Boletín 8 Lepra y Tuberculosis, 24 de marzo del 2025. O sea, es una foto absolutamente actual. Y ahí tenemos dos mapas.

El primer mapa nos muestra la incidencia de tuberculosis en toda la Argentina. Cuanto más oscuro, mayor es la incidencia

En CABA y en la provincia de Buenos Aires se observa una incidencia similar a la zona norte, que es donde se pensaba que era solamente donde había mayor incidencia de pobreza y, por lo tanto, iba a haber mayor incidencia de esta situación de enfermedades.

Pero, cuando ustedes observan la incidencia que hay en la provincia de Buenos Aires, o en la ciudad de Buenos Aires, no es algo nuevo, pero es algo que está oculto sistemáticamente, porque esto está hablando de que hay algo que no estamos haciendo claramente bien, no, mínimamente, de perspectiva sanitaria. Yo diría de perspectiva humana.

En realidad, las autoridades sanitarias de la nación, las autoridades del ministerio de Salud y las autoridades del hospital de enfermedades de tisio-neumonología más importante del país, que es el hospital “Profesor Dr. Raul Vaccarezza, conocen perfectamente esta situación. Lo que ocurre es que no se manifiesta, no se hace conocer, no se establecen diagnósticos y, por lo tanto, no se establece tratamiento. No se comunica. Implicaría que no se está haciendo bien las cosas cuando tenemos esta enfermedad que supuestamente había desaparecido.

La otra imagen siguiente, básicamente, lo que manifiesta es la mortalidad, que ocurre en la presencia de esta enfermedad, la tuberculosis. Esto es una epidemia, es una pandemia a nivel mundial. Los datos que tenemos, según el Ministerio de Salud, es que hoy muere una persona cada ocho horas en la República Argentina de tuberculosis. Esto es un Cromañon por mes o una tragedia de once y media por mes que ocurre actualmente en nuestro país. Por supuesto esto no se ve y por lo tanto no genera conciencia.

Y en esa situación estamos ahora con un gobierno que cortó de un 76% el presupuesto para el tratamiento de lepra y de tuberculosis. Esto ocurrió al inicio del año, es decir, en una situación en que necesitamos tratamiento diagnóstico y conciencia en toda esta situación, está pasando exactamente el contrario. Vamos a hablar un poco sobre el diagnóstico, porque en realidad la población mundial, el 25% de los seres humanos tiene incorporado la bacteria de la tuberculosis.

Pero no nos enfermamos, si vivimos en condiciones que el cuerpo nuestro está suficientemente fuerte para combatir eso. Cuando estás en situación de calle, cuando estás drogadicto, cuando hay mala alimentación, contaminada con agrotóxicos, cuando hay stress por hechos traumáticos o por el miedo que inculcan permanentemente desde los medios masivos de comunicación o por el stress generado por otras razones se produce una debilidad del sistema inmunológico y ahí la bacteria tiene la chance de tomar tu tierra. Entonces es muy importante encontrar la enfermedad para tratarla. Es decir realizar el diagnóstico para conocer la misma.

Hasta el momento la OMS, la Organización Mundial de la Salud, ha reconocido prácticamente a una empresa con su método de diagnóstico, que es una empresa de Estados Unidos, Cepheid, y que es parte del complejo militar industrial, muy ligado con el Pentágono. Esta empresa nace en el 96, pero tiene un salto cualitativo pocos días después del 11 de septiembre, cuando hay el ataque en Estados Unidos con el Antrax. Cuando unos senadores reciben una sustancia y se mueren alguna gente, estaban muy confundidos, inculpan a Irak para después invadirlo, y bueno, a partir de ahí Cepheid crece y se integra más todavía en el complejo militar industrial. Ese método para descubrir la bacteria, la enfermedad, de Cepheid se llama GeneXpert. Es eficaz el método y el diagnóstico, pero en los hospitales donde se utiliza se paga (entre 50 a 100 dolares ) 8 a 10 veces el precio de lo que sale el sistema que desarrollamos. La tuberculosis no es una enfermedad que se adquiere porque está el microbio presente, como casi ninguna otra enfermedad infecciosa. La tuberculosis la produce el mycobacterium tuberculosis. Es una bacteria que es un familiar del mycobacterium leprae, el que produce la lepra. En estos momentos en Argentina además de tuberculosis tenemos epidemia de sífilis, epidemia de HIV, epidemia de muchas cosas, además de epidemia a veces de pensamiento libre.

Para que tengamos una enfermedad tiene que haber la intercepción de tres conjuntos. Hay tres conjuntos que tienen que aparecer, confluir, la intercepción de esos tres conjuntos serían la presencia del bacilo o del bicho, un mal ambiente, un ambiente que sea por ejemplo vivir en la calle o trabajar doce horas seguidas como lo que pasa en las fábricas textiles, o vivir con miedo, como nos inculcan permanentemente a través de los medios masivos de comunicación, el miedo es la mejor forma de generar dominación. Cuando ocurre ese ambiente malo, el bicho malo, y nuestro cuerpo se desestabiliza, este equilibrio armónico y dinámico que es la vida misma, se desestabiliza por varias razones, después podemos comentar un poco lo que sería la enfermedad, ahí es donde el microbio aparece en nuestro cuerpo y viene a tomar nuestra tierra. El bicho toma la tierra nuestra y ahí se manifiesta la enfermedad. La tuberculosis no corresponde a una clase social, la tuberculosis corresponde a la intersección de estos tres conjuntos.

En una etapa en donde las clases menos pudientes no tenían una alimentación adecuada, entonces se había definido a la tuberculosis como la enfermedad de la pobreza y se comenzó a hablar en la decada del 60 siglo 20 que la tuberculosis había bajado en los estándares de contagio y como que estaba controlada. y ahora con todo lo que estamos viviendo, esencialmente el tema de la alimentación para mi es clave en todo esto y la falta de higiene, la falta a veces de no tener un lugar adecuado para dormir, y muchos otros factores han activado la enfermedad.

No podemos olvidar que vivimos en un país donde hay mas de 2 millones de niños en estado total de desnutrición y esto es una vergüenza porque supuestamente nuestro país podría producir alimentos para 300 millones de habitantes. Además hay grandes sectores de nuestro país que están ingiriendo agua contaminada, ya sea por contaminación ambiental con los agrotóxicos, por contaminación con arsénico, contaminación con los derivados de las mineras.

No pueden olvidarse que hace 5 o 6 años atrás la Barrick Gold tiró 3 millones y medio de litros de cianuro de sodio contaminando gran parte del norte de nuestro país, o sea hay una cuestión integral que genera que nuestro sistema inmunológico se disocie, se desarme y para poder estar sanos, ¿qué es la enfermedad? Teníamos que entrar a entender qué es una enfermedad, la enfermedad simplemente no la debemos tomar como algo malo, simplemente la deberíamos tomar como un aviso en nuestro cuerpo que estamos haciendo algo malo, cuando aparece una enfermedad es porque estamos haciendo algo malo.

Hay una gran tendencia, porque esto conviene obviamente a las transnacionales farmacéuticas, de tapar los síntomas, si comenzamos con un poquito de fiebre, en vez de investigar, ¿y por qué tengo la fiebre? Nos dicen toma esto para bajarte la fiebre, toma esto otro para bajarte la fiebre, toma el antibiótico que si a veces hay que tomarlo, te recetan como si nada diirectamente el paracetamol, que es hepatotóxico.

Exactamente, entonces nos tapan los síntomas, la fiebre es una respuesta de nuestro cuerpo, primero nos dice mira acá está pasando algo, yo reacciono de esta manera y reacciono de esta manera así que fíjate, bajate la fiebre, obviamente si la fiebre supera los 40 grados o los 39 y pico de grados hay que bajarla porque nos va a agarrar una convulsión, pero si no lo que tendríamos que hacer es darnos un baño, no tapar el síntoma y descansar, nuestro cuerpo se repara solo, es maravilloso, la naturaleza es maravillosa, somos emergentes de la naturaleza, si no entendemos esto es difícil que podamos tratarnos.

Hay una cosa que que se llaman los biomarcadores y que lo he aprendido hace ya mucho tiempo, mi abuelo me lo enseñó pero después lo hemos conversado muchísimo con Andrés Carrasco, que Andrés Carrasco denunció el envenenamiento masivo con el glifosato que se hizo en nuestra población para

vender la soja transgénica, supuestamente para tener dinero, pero de que sirve el dinero y luego nos morimos por la contaminación. Los biomarcadores que son los bichitos de luz, las mariposas, las abejas, las ranas, los colibríes, esos se llaman biomarcadores, si ustedes van a un lugar, los pececitos pequeños van a un lugar y ven los biomarcadores, ese lugar está bueno para la vida porque nosotros somos naturaleza, no somos otra cosa. Si no hay, vayan a un campo de soja fumigado y van a ver si encuentran, hay un silencio absoluto, no escuchan nada. Vamos a volver un poco a la tuberculosis porque en esa situación que usted ha descrito muy bien, hay enfermos que hay que tratar, el primer paso es el diagnóstico.

Hemos trabajado desde hace mucho tiempo en desarrollar un sistema que está basado en un PCR, que es nacional, soberano, autónomo de bajo costo y que se puede utilizar por su bioseguridad (protege al trabajador como primera medida) y que ha sido validado contra el GeneXpert este marzo abril en un trabajo internacional que realizamos en Oruro, Bolivia a 3700 mts de altura.

No hacer un diagnóstico adecuado de lo que nos está pasando es como estar parado en las vías de un tren mirando para el otro lado donde viene el tren. El tren va a venir y nos va a pasar por encima, si nos damos vuelta y miramos hacia donde viene el tren, nos corremos de las vías y el tren pasa por el lado y no nos mata.

Hacer un diagnóstico adecuado es fundamental, porque si bien la tuberculosis es una enfermedad muy seria, porque comparado con el COVID que tenía un 2,5% de letalidad, que es la letalidad de la gripe común, la tuberculosis tiene cerca de un 13% de letalidad. O sea, es una enfermedad muy seria, por ende, debemos establecer diagnósticos, este mapa probablemente tiene un gran nivel de subdiagnóstico de lo que nos está pasando, porque se oculta.

Los síntomas dependen de la gravedad del tema, si por ejemplo en un paciente HIV positivo puede haber una tuberculosis cerebral, entonces se manifiesta como un tumor cerebral. En los pacientes con tuberculosis avanzadas, lo que se observa es una tos seca de varios meses o de varias semanas, sudoración nocturna, temperatura, esos son los síntomas que se manifiestan. Son síntomas que muchas veces ni siquiera se toman como si son de la tuberculosis, por eso es importante avanzar sobre los diagnósticos.

Pero lo mas importante es saber que la tuberculosis TIENE TRATAMIENTO Y CURA, pero hay que DIAGNOSTICAR

Precisión diagnóstica del nuevo y bioseguro ensayo molecular Orange G3 para tuberculósis

La tuberculosis (TB) sigue siendo una prioridad de salud pública mundial, con 10,5 millones de casos nuevos y 1,5 millones de muertes notificadas en 2023. Los métodos de diagnóstico actuales enfrentan limitaciones en sensibilidad, bioseguridad y accesibilidad, particularmente en entornos de bajos recursos.

Precisión diagnóstica del nuevo y bioseguro ensayo molecular Orange G3 TBC en comparación con GeneXpert para el diagnóstico de tuberculosis en entornos con recursos limitados.

Autores: Dr. Richard H. Chiara M. richard.chiara@doc.uto.edu.bo Cel: 71848651
PhD. Juan Carlos Garberi garberi@retina.ar Cel: 549-1167897119
Gabriel Estryk, Pierre Kory, Patricia Callisperis, Patricia Loza, Luis Scigliano, Sandra Casevecchie, Juan Ezequiel Garberi, Edgar Villarte, Mike Acevedo, Monica Castro, Guadalupe Calvo, Alex Huarachi, Leydi Martinez, Lucia Langer, Luis Prieto, Mitchell Liester, Carlos Franco Paredes.
https://doi.org/10.1177/20499361251386681 – https://journals.sagepub.com/doi/10.1177/20499361251386681

Descripción

Orange G3 TBC: una alternativa novedosa y biosegura para el diagnóstico de la tuberculosis en entornos con recursos limitados: La tuberculosis (TB) es un importante problema de salud mundial en la actualidad, causando 10,5 millones de casos nuevos y 1,5 millones de muertes para 2023.

El diagnóstico rápido y preciso es particularmente difícil en entornos con recursos médicos limitados.
En este estudio, evaluamos una nueva herramienta de diagnóstico llamada Orange G3 TBC contra la prueba GeneXpert Ultra de uso generalizado, recomendada por la OMS.

Examinamos 71 muestras de pacientes (principalmente esputo y líquido cefalorraquídeo) con sospecha de TB. Ambas pruebas se realizaron en cada muestra. Orange G3 TBC mostró una precisión similar a GeneXpert Ultra, detectando TB en el 90% de los casos positivos y descartándola correctamente en el 97% de los casos negativos. Proporcionó valores predictivos robustos y un alto nivel de concordancia con el método de referencia.

Cabe destacar que Orange G3 TBC incluye un sistema de manejo de muestras más bioseguro, lo que lo hace adaptable para su uso en clínicas con recursos limitados. Estos hallazgos sugieren que la prueba Orange G3 TBC podría ser una opción confiable y más accesible para el diagnóstico de tuberculosis en áreas donde la enfermedad es común y falta una infraestructura de laboratorio avanzada.

RESUMEN

La tuberculosis (TB) sigue siendo una prioridad de salud pública mundial, con 10,5 millones de casos nuevos y 1,5 millones de muertes notificadas en 2023. Los métodos de diagnóstico actuales enfrentan limitaciones en sensibilidad, bioseguridad y accesibilidad, particularmente en entornos de bajos recursos.

Este estudio evalúa la precisión diagnóstica de una nueva plataforma de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (Orange G3 TBC), comparándola con el sistema GeneXpert Ultra avalado por la OMS en Oruro, Bolivia. Realizamos un estudio aleatorizado, doble ciego.El estudio incluyó 71 muestras clínicas (67 muestras de esputo y 4 muestras de líquido cefalorraquídeo) de pacientes con sospecha de tuberculosis.

Todas las muestras se analizaron con GeneXpert Ultra y la plataforma Orange G3 TBC, que incorpora un sistema de procesamiento bioseguro único. El análisis estadístico incluyó la sensibilidad, la especificidad, los valores predictivos (valor predictivo positivo [VPP] y valor predictivo negativo [VPN]), los cocientes de verosimilitud (LR+ y LR−) y las medidas de correlación.

La prueba Orange G3 TBC mostró un rendimiento excelente en comparación con GeneXpert Ultra: sensibilidad = 90%, especificidad = 97%, eficiencia diagnóstica = 96%, VPP = 82% y VPN = 98%. El análisis estadístico mostró una alta correlación entre ambos métodos (correlación de Pearson = 0,834, kappa = 0,832, LR+ = 27,3, LR− = 0,103).

En conclusión la plataforma Orange G3 TBC ofrece una precisión diagnóstica comparable a la de GeneXpert Ultra. El sistema se adapta a entornos con recursos limitados, lo que la convierte en una alternativa viable para el diagnóstico de tuberculosis en regiones endémicas.

Precisión diagnóstica del nuevo y bioseguro ensayo molecular Orange G3 TBC en comparación con GeneXpert para el diagnóstico de tuberculosis en entornos con recursos limitados

INTRODUCCIÓN

La tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa causada por Mycobacterium tuberculosis ( M. tuberculosis ) y es responsable de más de mil millones de muertes en los últimos 200 años. ¹ La carga mundial de TB se concentra en los países en desarrollo, particularmente en América Latina, África y algunas regiones de Asia. ² A pesar del impacto mundial de esta enfermedad, las tasas de detección de casos siguen siendo muy bajas en muchos entornos endémicos, lo que representa un obstáculo significativo para los esfuerzos de control de la TB. En 2023, la Organización Mundial de la Salud (OMS) reportó 10,5 millones de casos de TB y 1,5 millones de muertes. 2 El riesgo de transmisión de la TB está vinculado a factores sociales y económicos, como la baja escolaridad, el hacinamiento, la desnutrición y la exposición ocupacional. ³

La confirmación diagnóstica de la tuberculosis sigue siendo un desafío significativo en entornos de bajos ingresos y recursos. Es probable que haya una gran cantidad de casos no detectados que fomentan cadenas continuas de transmisión de tuberculosis que, en última instancia, conducen a un sufrimiento humano incalculable. 2 Bolivia informa aproximadamente 8000 casos de tuberculosis cada año, con 200 muertes relacionadas con la tuberculosis en 2023. ⁴

La microscopía de frotis ha sido la herramienta estándar para diagnosticar la tuberculosis en Bolivia durante décadas. ⁵ Esta prueba tiene múltiples limitaciones, incluida su baja  sensibilidad y el riesgo de transmisión al personal de laboratorio, y ofrece un valor limitado en el diagnóstico de tuberculosis extrapulmonar e identificación de casos de tuberculosis pulmonar en niños. ⁶

GeneXpert es una tecnología molecular avanzada con el potencial para el diagnóstico rápido de tuberculosis. 7 Desde 2010, la OMS ha respaldado esta herramienta molecular avanzada para diagnosticar la tuberculosis debido a su alta sensibilidad y especificidad combinadas. ^{7 , 8}

El uso de GeneXpert para el diagnóstico rutinario de tuberculosis aumenta los costos de las pruebas del sistema de salud en comparación con la microscopía de frotis. Al elegir una prueba molecular, se deben considerar múltiples factores. Incluso con comparaciones similares, el acceso continuo e ininterrumpido a los suministros y la facilidad de mantenimiento son fundamentales .

El Orange G3 TBC es una plataforma de amplificación de ácidos nucleicos que ofrece importantes ventajas en el diagnóstico de la tuberculosis. Se desarrolló en Argentina en 2009 con un dispositivo diseñado para evitar el riesgo de transmisión aérea al operador. La plataforma ha sido validada en estudios previos ^9-11 y autorizada para uso diagnóstico clínico por la Agencia Nacional de Medicamentos y Tecnología Médica (ANMAT) de Argentina. ¹²

Este sistema de diagnóstico utiliza herramientas que brindan bioseguridad al operador y ofrece instrucciones de uso sencillas y fáciles de seguir. Estas características permiten su implementación en entornos remotos y de bajos recursos.

En este estudio, realizamos un estudio comparativo de la plataforma Orange G3 TBC (desarrollada y fabricada en Argentina, Orange Solutions SRL), utilizando GeneXpert Ultra para la comparación en el departamento de Oruro, Bolivia (3700 m sobre el nivel del mar). Orange G3 TBC presenta resultados categorizados según la carga baciliar de la muestra analizada mediante termociclado y fluorometría, que se clasifica como detectable cuando el número de fluorescencia del algoritmo es mayor que el valor negativo más el valor seminegativo; no detectable cuando el número de muestra del algoritmo es un número negativo; e indeterminado cuando el número del algoritmo se encuentra entre ambos.

Este estudio evalúa una plataforma diagnóstica innovadora en un entorno endémico de tuberculosis en Sudamérica. Al abordar barreras críticas como la asequibilidad y la accesibilidad, la plataforma Orange G3 TBC tiene el potencial de satisfacer la urgente necesidad de herramientas diagnósticas avanzadas capaces de transformar los esfuerzos de control de la tuberculosis a nivel mundial.

MATERIALES Y MÉTODOS

Diseño del estudio y recolección de muestras
El objetivo de este estudio fue comparar la precisión diagnóstica del sistema Orange G3 TBC con el sistema GeneXpert Ultra en personas con diagnóstico presuntivo de tuberculosis. Orange G3 TBC es una plataforma diagnóstica que podría utilizarse en entornos de recursos limitados en Bolivia y en otros lugares donde GeneXpert Ultra no está ampliamente disponible. Orange G3 TBC ofrece resultados categorizados según la carga baciliar de la muestra analizada por termociclado y fluorometría, que se clasifica como detectable cuando el número de fluorescencia del algoritmo es mayor que el valor negativo más el valor seminegativo, no detectable cuando el número de muestra del algoritmo es negativo e indeterminado, cuando el número del algoritmo está entre ambos. Los resultados de GeneXpert para la detección de M. tuberculosis también se presentan como positivos, negativos e indeterminados, 7 que fue el objeto de comparación en este estudio.

El sistema Orange G3 TBC utiliza un algoritmo validado en estudios previos realizados con Orange G3 TBC y el estándar de oro consensuado académicamente, que es el cultivo de bacilos. ^9-14 La carga bacilar se correlaciona con el valor del algoritmo de cada muestra analizada. Todas las muestras positivas se analizan para determinar la resistencia a la isoniazida y la rifampicina utilizando el mismo ADN purificado. Se evaluaron muestras clínicas de pacientes con un cuadro clínico compatible con tuberculosis, atendidos entre marzo y abril de 2025 en centros de salud rurales e interurbanos de la ciudad de Oruro, Bolivia. El informe de este estudio cumple con la declaración STARD. 15
Se examinaron 67 muestras de esputo y cuatro muestras de líquido cefalorraquídeo.

El tamaño de la muestra se consideró adecuado para estimar el rendimiento diagnóstico de la prueba ( n = 71). Específicamente, se asumió que una muestra que incluyera al menos 10 casos de enfermedad permitiría estimar la sensibilidad con un error estándar aceptable (±10%–15% con un IC del 95%), asumiendo una sensibilidad esperada del 90%. Además, la muestra observada arrojó un LR+ con un intervalo de confianza suficientem ente estrecho para fines exploratorios.

Todas las muestras se analizaron utilizando GeneXpert Ultra, tecnología Cepheid y un sistema de PCR fluorométrico hemi-anidado balanceado (Orange G3 TBC) que podría preservar la seguridad del trabajador y producir un material relativamente puro libre de inhibidores potenciales. Las muestras se analizaron mediante microscopía de frotis y luego se enviaron al Laboratorio Central de Tuberculosis en la ciudad de Oruro, Bolivia (el único laboratorio en Oruro, de 50, con la capacidad de realizar GeneXpert). Los parámetros de validación entre Orange G3 TBC y la microscopía se detallan en Garberi et al., ¹⁰ que mostró una sensibilidad del 94,7% para Orange G3 TBC contra una sensibilidad del 46%–78% para la detección de frotis. La purificación de ADN de Orange G3 TBC se realizó licuando el esputo en un recipiente sellado utilizando una llave de paso de tres vías ( Figura 1 ), y luego inactivando la muestra sumergiendo el recipiente a 88 °C durante 20 min, lo que inactiva todas las bacterias. ¹¹

Todas las muestras fueron analizadas de forma aleatoria, doble ciego e independiente utilizando los sistemas GeneXpert Ultra y Orange G3 TBC.

Orange G3 se basa en un termociclador fluorométrico de punto final dedicado al diagnóstico de enfermedades infecciosas. El sistema procesa las muestras mediante una serie de pasos, que incluyen (1) licuefacción de la muestra (para material de esputo); (2) inactivación biológica; y (3) purificación del ADN. En cuanto a las dianas genéticas y los cebadores, las dianas utilizadas se describen en estudios previos. ^{10 , 11}

La diana de amplificación es un segmento del fragmento de inserción de MTB IS6110.

El proceso se lleva a cabo en un sistema cerrado de jeringas, filtros y absorbentes, lo que elimina el contacto con el medio ambiente y mejora la bioseguridad ( Figura 2 ). El paso final produce material genético concentrado para la amplificación. El ADN se aisló mediante un método Boom simplificado ¹⁴ y se almacenó a -20 °C hasta su amplificación. La amplificación del ADN se realizó en un termociclador-fluorómetro TB ( Figura 3 ).

El ADN bicatenario se detectó fluorométricamente mediante un software diseñado a medida y un fluorocromo intercalante de ADN. Toda la reacción se realizó en un solo tubo que permaneció sellado tras la adición de la muestra para minimizar la contaminación cruzada con amplicones.

Para comprobar la simplicidad de nuestro procedimiento, un equipo con tan solo dos días de formación realizó el procesamiento y los análisis de las muestras. Las muestras se procesaron utilizando nuestra metodología de extracción mejorada (procedimiento de bioseguridad Orange G3 TBC para muestras de tuberculosis, seguido de purificación de ADN con sílice).

ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Realizamos un análisis estadístico utilizando la prueba de chi-cuadrado de McNemar, la correlación de Pearson y la medida Kappa para evaluar las diferencias entre Orange G3 TBC y GeneXpert Ultra, y determinar los valores predictivos positivos y negativos (VPP y VPN, respectivamente), el porcentaje de error, la eficiencia diagnóstica, la especificidad, la sensibilidad y las razones de verosimilitud (LR+ y LR−).

DISCUSIÓN

La tuberculosis se puede prevenir y tratar; sin embargo, su resurgimiento en la era posterior a la COVID-19, junto con la propagación concomitante de cepas resistentes a los medicamentos, representa un importante problema de salud pública mundial. Para lograrlo, es crucial contar con herramientas de diagnóstico de alta calidad, seguras y asequibles para diagnosticar los numerosos casos no identificados en entornos de bajos ingresos y recursos limitados donde la tuberculosis tiene una alta prevalencia. ^{16 , 17}

En las Américas, Perú y Bolivia reportan la mayor carga de tuberculosis, con tasas de incidencia de 100 a 299 por 100.000 habitantes por año. 2 Al igual que otros entornos de alta incidencia, Bolivia enfrenta limitaciones críticas para reducir la carga de la enfermedad debido a la disponibilidad limitada de las capacidades de diagnóstico actuales.

A pesar de la recomendación de la OMS de ampliar la implementación del diagnóstico molecular ¹⁵ para la tuberculosis, solo unos pocos laboratorios tienen acceso a GeneXpert, y la mayoría de ellos requieren enfoques tradicionales como la baciloscopía, que tienen baja sensibilidad y presentan riesgos de exposición del operador.

La necesidad de rapidez también es un factor importante cuando los resultados de las pruebas impactan positivamente en la toma de decisiones relacionadas con el control de infecciones, en cuanto al aislamiento de pacientes y el manejo terapéutico de pacientes con tuberculosis pulmonar activa.

En estas situaciones, los métodos de diagnóstico molecular pueden proporcionar los datos necesarios con mayor rapidez y ofrecer una ventaja operativa significativa para los médicos.
GeneXpert es una prueba de diagnóstico molecular rápida, precisa y de baja complejidad en el punto de atención, recomendada por la OMS. ⁷

A pesar de los beneficios de ampliar el uso de GeneXpert en muchos entornos, su uso generalizado es limitado. En Oruro, Bolivia, una provincia con altas tasas de transmisión de tuberculosis, solo uno de los 50 laboratorios con capacidad para procesar muestras para el diagnóstico de tuberculosis cuenta con tecnología GeneXpert. Los otros 49 laboratorios emplean baciloscopia.

Al evaluar nuevas herramientas de diagnóstico para la tuberculosis, surgen varias consideraciones clave, como su rendimiento, la rentabilidad diagnóstica y los requisitos técnicos. Los nuevos métodos de diagnóstico deben ser al menos tan eficaces como las herramientas existentes y, a la vez, adecuados para los países de bajos recursos con la mayor carga de tuberculosis.

En cuanto a la precisión diagnóstica, si bien muchos métodos de amplificación de ácidos nucleicos (NAA) muestran una alta sensibilidad y especificidad en muestras con baciloscopia positiva, su rendimiento suele ser menor en muestras con baciloscopia negativa o extrapulmonares, precisamente donde una mejora en el diagnóstico sería más valiosa. ⁷

Los kits comerciales actuales de diagnóstico molecular siguen siendo costosos para la mayoría de los laboratorios de diagnóstico de tuberculosis en países de bajos recursos. Finalmente, en cuanto a los requisitos técnicos, muchos procedimientos moleculares requieren equipos sofisticados y personal altamente cualificado, que suelen estar disponibles solo en países desarrollados o en laboratorios centrales en regiones endémicas de tuberculosis.

Hasta que se aborden adecuadamente estas limitaciones, las costosas técnicas comerciales de NAA seguirán restringidas a países desarrollados o laboratorios académicos y de investigación con financiación adecuada, muy alejadas de los programas de control de la tuberculosis en entornos con alta carga de tuberculosis. Cualquier método nuevo, ya sea sofisticado o simple, comercial o interno, debe ser sometido a una evaluación rigurosa mediante ensayos clínicos bien diseñados en entornos de bajos recursos donde su implementación beneficiaría más los esfuerzos de control de la tuberculosis.

Este estudio demuestra el potencial de un nuevo dispositivo de diagnóstico molecular para abordar estos desafíos y mejorar los esfuerzos de control de la tuberculosis. Una diferencia metodológica fundamental entre GeneXpert y Orange G3 TBC reside en sus enfoques de procesamiento de muestras. Mientras que GeneXpert analiza una alícuota limitada (0,5–2,0 mL), la plataforma Orange G3 TBC procesa el volumen de muestra disponible, seguido de la concentración y purificación del ADN.

Este enfoque teóricamente mejora la sensibilidad de detección, lo que podría explicar los resultados discordantes donde Orange G3 TBC detectó tuberculosis en dos muestras que dieron negativo con GeneXpert Ultra. Como se muestra en la Tabla 2 , los resultados de Orange G3 TBC se correlacionan bien con los de GeneXpert Ultra. Por lo tanto, Orange G3 TBC podría ser una herramienta valiosa para aumentar la eficiencia de detección de la tuberculosis, particularmente en muestras con bajas cargas bacilares. Además, esta plataforma de diagnóstico es fácil de usar, lo que aumenta la viabilidad de su implementación en regiones con recursos limitados, como se menciona en el estudio de Ssengooba et al. ¹⁸

Gracias a su diseño de bioseguridad integrado, el sistema Orange G3 TBC permite el procesamiento completo de las muestras sin necesidad de una campana de flujo laminar. Esto representa una ventaja significativa para la seguridad del operador, minimizando el riesgo de exposición durante la manipulación de materiales potencialmente infecciosos.

La implementación de estos dispositivos en entornos de bajos recursos podría facilitar el acceso a diagnósticos moleculares sensibles sin comprometer la seguridad del personal de laboratorio. El orden de adición de los reactivos, sumado a la exposición del receptor con la muestra a una temperatura superior a 70 °C durante 15 minutos, garantiza que, en los pasos posteriores del procedimiento de extracción de ADN, los bacilos se inactiven completamente y no puedan infectar al operador. ¹³

Los resultados diagnósticos obtenidos en este estudio son muy similares entre GeneXpert Ultra y Orange G3 TBC. Una ventaja clave de la plataforma Orange G3 TBC es que los operadores de salud pueden aprender a procesar y analizar muestras con una capacitación mínima. El sistema requiere una instalación sencilla, y su contenedor de bioseguridad representa una diferencia significativa con respecto a otros métodos disponibles.

El personal sanitario especializado en tuberculosis suele reconocer a GeneXpert como la única plataforma de diagnóstico molecular de tuberculosis disponible. Estudios comparativos adicionales en Latinoamérica y a nivel mundial podrían generar conciencia sobre opciones alternativas para abordar el desafío global del diagnóstico de la tuberculosis. Este proyecto se llevó a cabo con recursos mínimos, lo que pone de relieve la necesidad de un mayor apoyo  gubernamental e institucional para el desarrollo regional de tecnologías sanitarias.

CONCLUSIÓN

El objetivo de este estudio fue comparar la precisión diagnóstica del sistema Orange G3 TBC con la del sistema GeneXpert Ultra en personas con diagnóstico presuntivo de tuberculosis. Se demostró que el sistema Orange G3 TBC obtiene resultados estadísticamente similares a los obtenidos con GeneXpert Ultra, objetivo de la investigación clínica diagnóstica.

Se destaca que la plataforma Orange G3 TBC presenta características de rendimiento comparables a las del sistema GeneXpert Ultra, avalado por la OMS, para el diagnóstico de tuberculosis, con bioseguridad y accesibilidad en Sudamérica, y una sensibilidad potencialmente mejorada mediante el procesamiento de muestras completas.

Con requisitos mínimos de capacitación y adaptación a entornos de bajos recursos, el uso de este sistema implica la comprensión de los pasos a seguir, adquiridos durante la capacitación del operador, lo que se traduce en un mejor rendimiento del proceso diagnóstico. Esta tecnología, desarrollada en Latinoamérica, ofrece una alternativa viable para expandir el diagnóstico molecular de tuberculosis a las regiones desatendidas con mayor carga de enfermedad.

Nuestro estudio presenta limitaciones significativas, como que las pruebas se realizaron en un solo laboratorio en un solo país. La plataforma Orange G3 TBC para el diagnóstico de tuberculosis no permite la detección de la resistencia a la rifampicina en un solo paso, a diferencia de GeneXpert Ultra.

Aprobación ética y consentimiento para participar. Este estudio fue aprobado por el Comité de Ética de la Facultad de Medicina de la Universidad Técnica de Oruro, Bolivia, en febrero de 2025.

Todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito antes de su inscripción en el estudio. Esta investigación se realizó de acuerdo con la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial.

Conflictos de intereses Los autores declaran que no existe ningún conflicto de intereses.
Disponibilidad de datos y materiales Universidad Técnica de Oruro, Bolivia.

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